细胞与细胞外基质之间的关系

细胞与细胞外基质之间的关系在细胞生物学和行政中的主要和细胞外基质中。或酒窖膜抽出(BME)。 3D中的成纤维细胞形成具有较少的横向突起,并且基本上减少了比在2D基质上的肌动蛋白应激纤维的较少;细胞未能在3D BME中传播。在所有基质中检测到细胞基质粘附结构。尽管这些细胞粘连的形状不同于2D和3D CP-466722中的细胞 - 矩阵粘连CP-466722占据的每个电池的总面积几乎相同。成纤维细胞在细胞衍生的3D基质和胶原中最快地迁移,并在BME中以最高的迁移方向性在细胞衍生矩阵中迁移。这种对不同基质组成和维度的细胞反应的定量差异的定量差异应该有助于指导用于组织工程的定制3D组织培养和基质支架的发展。引言用于组织工程的最佳生物相容性支架的开发需要深入了解细胞之间的关系以及来自感兴趣的细胞的细胞外基质。最近有机三维(3D)矩阵已经采用了用于检查细胞矩阵关系的更具生理学版本,而不是传统的二维(2D)细胞传统.1-14初始研究比较2D和3D矩阵中的细胞行为揭示了细胞形态的差异9 11迁移1 9粘连1和信号传导.4 15这些发现建立了基质维度的需求’S 3与2D。然而,尽管细胞环境在矩阵结构中可能会显着不同,但迄今为止迄今为止的研究通常以特定的3D模型为中心。来自成纤维细胞的胶原凝胶21细胞衍生的矩阵(CDM)中的四个来自成纤维细胞116纤维蛋白凝胶27 28和酒窖膜抽出(BME或Matrigel).29胶原蛋白,I可以是最常用的基质蛋白3D研究广泛.31 31胶原蛋白我作为纤维存在,它是结缔组织的主要元素。这CP-466722细胞使用以结合3D胶原蛋白的主要整联蛋白受体可以是α2β1.11CDM是由成纤维细胞天然产生的基质蛋白的3D复合。成纤维细胞创造厚3D矩阵飞机后。成纤维细胞以5Ω·103个细胞/ cm2的致密性覆盖到2D基质上。 3矩阵以四种类型的3D矩阵规划每个来自四种类型的3D矩阵的典型步骤在图1中以图1表示。 1. 3D细胞外基质的时代。在蛋白质浓度的组分和策略部分中被创建的每个矩阵主要在书中发现(5?mg / ml CDM 10 BME 2.5胶原蛋白 …从小鼠NIH-3T3的高密度7天时间种族中产生细胞衍生的矩阵CDM,同时描述。每2次加入45抗坏血酸(50Ωμg/ ml;σ)。基质的总蛋白质浓度取决于利用Nanodrop ND-1000分光光度计(在3D矩阵中以1Ω间隔获取切片的脱胍测量的溶解。使用LSM目标浏览器软件程序获取数码图片。所证明的每个数字可以代表至少三个独立的测试,检查至少5-10个单元。图片处理图像已经使用imagej(niH)和Metamorph离线7.0软件程序(分子产品)。3D矩阵中的细胞片已经预计最大地制作2D图片。利用平滑过滤系统和历史减法(需求提供的过滤细节)。通过执行最大投影滤波以减少阈值以使阈值进行阈值来量化这些图片的数据图像和比较突出显示的像素量。CDM中细胞形态细胞的定量已染色Wi对阴脂蛋白和纤连蛋白抗体分别观察细胞以及基质。已经获得了许多共焦切片兔多克隆到PDK4。包围完整的细胞。 Phalloidin图片已经通过手工统称和阈值,或者立即在Metallph中投射,以计算每个CP-466722中的成纤维细胞的空间宽度和总细胞扩散部分。对于杯子胶原蛋白和BME上的细胞,细胞已用Dylight 649-Cengavalin A标记。已经捕获了共聚焦图像以及在Metormorph中确定了展开的CP-466722。延时显微镜细胞在CP-466722的致密度上被覆盖到基质上仅为1的致密量为1?×104每mL。经过夜间孵化细胞运动后。